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正文摘录:

临床和实验医学杂志2008年3月第7卷第3期中药生精汤对雄性不育大鼠睾丸转化生长因子一13。表达的影响李涛范好刘芳(陕西中医学院组胚教研室陕西咸阳712046)【摘要】目的观察中药生精汤对雄性不育大鼠睾丸转化生长因子一pt(TGF—p-)表达的影响。方法40只sD大鼠随机分为正常组、模型组、小剂量组、大剂量组，采用腺嘌呤制作雄性大鼠不育模型，小、大剂量组给予生精汤灌胃。造模后30d处死大鼠，观察睾丸组织形态学变化；采用免疫组织化学法及图像分析系统检测睾丸内TGF—p一的平均光密度；同时测定大鼠体质量和睾丸质量。结果大剂量组与模型组比较睾丸系数明显增加(P＜o·05)；TGF—pt阳性表达主要见于早期精母细胞、圆形精子细胞以及支持细胞，生精汤大剂量组TGF—p。阳性的表达与模型组比较明显降低(P＜0.01)。结论生精汤通过下调TGF—p，的表达实现对睾丸生精功能的调节，对腺嘌呤所致的雄性大鼠不育有一定的治疗效果。【关键词】生精汤不育转化生长因子一p。大鼠睾丸EffectofShengjingDecoctiononexpressionofTGF—p1intestisofsterilerats.“Tao，FANYu，LIUFang·Embryonics#谚舶黼，鼽口眦iCollegeofTraditionalChineseMedicine，XianyangShanxi712046，China·【Abstract】objectiveT0investigatetheefiectofShengjingDec。etion。nexpression。fTGF—p1intestisofmalesterilemts·M。th。d。Altogether40SDratswererandotalydividedintofourgroups：normalgroup，modelgroup，lowandhighdosageShengjingD。。。。‘i。ngroups.Infbrtileratmodelwasestablishedbyadministrationofadenine.RatsinlowandhighdosageShengjingDecoctiongroup。w。re‘。。。。tedwithShengjingDecoctionthroughstomachfilling.After30days，allratswereexecuted.Histomorphologiealchang。。。“‘。。tl。w。。。。b—served.MeanopticaldensityofTGF一131wasdetectedbyimmunohistochemicaltechniqueandimageanalysissystem·B。dYw。。ghtandtes-tisindex0fratswerealsomeasured.ResultsTestisindexinhighdosageShengjingDecoctiongroupwassignificantlyhigh。。thanthatofmodelgroup(P＜0.05).TGF—B1expressionwasobservedinearlystagespermatocytes，roundspermatidandSertoli's。。1l。·In。omp。n-sonwithmodelgr【)up，theexpressionofTGF—BlintestisofratsinhighdosageShengjingDecoctiongroupwassig“。t‘。。“‘lyd。。rea。。d【，＜0.01).ConclusionShengiingDecocti。ncanregulatetesticular。permat。genicfuncti。nthroughdownregulationofexprsssion0fTGF—B1andithascertaintherapeuticeffectsonadenine—inducedmalesterilerats·【Keywords】ShengjingDecoction；Infertility；TGF—pl；Rats；Testis转化生长因子B超家族(transforminggrowthfactor，TGF—p)是一组以多肽形式存在的细胞因子，具有多种生物学活性，在调节细胞增殖、识别、分化以及凋亡等方面发挥着重要的作用”。。近年来的研究表明，TGF—p。参与了精子发生，从围产期到成年期的睾丸中均有TGF—p，的表达Ⅲ。本实验中，我们采用自拟生精汤治疗腺嘌呤所致睾丸功能损害的大鼠模型，通过对TGF—B。的表达和定位进行研究，观察其对生精障碍大鼠的治疗作用。1材料与方法1.1材料清洁级sD雄性大鼠40只，体质量220—240g，由西安交通大学医学院实验动物中心提供；自拟生精汤由菟丝子、覆盆子、五味子、枸杞子、车前子、鹿角胶、淫羊藿、当归、川续断、黄芪、丹参、赤芍、何首乌等组成(水煎浓缩至1.2g生药／m1)；兔抗TGF—B，多克隆抗体购自武汉博士德生物工程有限公司；图像分析系统组成：ImagerAl光学显微镜(德国Zeiss公司)，DXMl200数码CCD(日本Nikon公司)，JD一801图像分析软件(江苏捷达科技有限公司)。1.2方法1.2.1分组及造模将40只雄性sD大鼠按体质量分层后随机分为4组：正常组、模型组、生精汤小剂量组(小剂量组)、生精汤基金项目：陕西中医学院科研基金(sntem200504)大剂量组(大剂组)，每组10只。正常组给予不含腺嘌呤的饲料，其余各组给腺嘌呤饮食(每100g固体饲料中混入0.6g腺嘌呤)，自由饮食，持续30d。1.2.2给药方法自第31d起，小剂量组和大剂量组每日用生精汤灌胃，分别为1g生药／100g、1.5g生药／100g，稀释到2ml／100g灌胃，连续30d。正常组和模型组灌胃等量生理盐水。1.2.3睾丸系数检测大鼠腹腔注射戊巴比妥麻醉，取双侧睾丸并用滤纸吸去表面的体液，称重睾丸质量，计算睾丸系数：睾丸系数=睾丸重量／体质量×100％。1.2.4苏木素伊红(HE)染色睾丸经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋，4仙m厚切片，行HE染色，显微镜下观察各组大鼠睾丸形态学变化。1.2.5免疫组化检测睾丸TGF—p。的表达，严格按照试剂盒操作步骤进行。镜下棕黄色为阳性染色，每张切片400倍光镜下随机取5个不重叠视野，TGF—p。蛋白的表达应用图像分析系统计算视野的平均光密度，分析前进行光密度的校准以扣除背景着色的影响，每张图片平均光密度的计算方法为视野阳性染色的积分光密度除以图片的总面积，取5张图片的平均值为该切片的结果。1.2.6统计学方法使用SPSS12.0进行统计分析，备组数据.均以均数±标准差(互4-s)表示，均数间比较用单因素方差分