《临床和实验医学杂志》2008年第3期摘录:·74·Journalo厂Cl
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·74·Journalo厂Clinic乜zn,“Experirmj几£nfMedici,坤l,0Z.7,,vD.3Mar.2008益肾汤对糖尿病大鼠阴茎一氧化氮合酶活性影响的实验研究李红梅李淑华高斌(辽宁省糖尿病治疗中心辽宁沈阳110015)【摘要】目的研究益肾汤治疗糖尿病勃起功能障碍的可能机制。方法48只Wista~’大鼠随机分为3组:正常组、糖尿病组、治疗组,其中糖尿病组予链脲佐菌素60m晷/k腹腔注射;治疗组予益肾汤17.7g/(kg·d)灌胃。检测各组2个月后的血糖,阴茎勃起潜伏期,酶组化及图像分析观察阴茎海绵体中一氧化氮合酶(N0s)的活性。结果治疗组的血糖略低于糖尿病组,差异无显著性(P>0.05)。治疗组阴茎勃起潜伏期明显短于糖尿病组,差异具有显著性(JP<0.05)。治疗组的勃起潜伏期、NOS阳性反应与正常组接近。结论益肾汤能明显缩短阴茎的勃起潜伏期,其可能的机制是提高阴茎海绵体肌NOS的活性,而不是依赖降血糖。【关键词】大鼠糖尿病勃起功能障碍一氧化氮合物酶益肾汤中医药治疗糖尿病勃起功能障碍是糖尿病常见的并发症。国外报道糖尿病性勃起功能障碍的患病率为50%,~。75%,国内报道为39.6%。糖尿病病程10年后50%以上的病人出现勃起功能障碍。随着糖尿病患者寿命的延长和生活质量的提高,越来越多的人渴望得到治疗“J。我们应用益‘肾汤治疗糖尿性勃起功能障碍取得较好临床疗效。为探讨其作用机制,我们观察了益肾汤对阴茎海绵体一氧化氮合酶(NOS)的作用。1材料与方法1.1动物分组与造模Wistar雄性大鼠(体质量180~220g)购自沈阳药科大学动物研究中心。随机选取16只作为正常组。其余给予链脲佐菌素(Sigma公司)60mg~,kg腹腔注射,第7d眶后静脉采血测血糖,血糖≥12mmoL/者,按血糖随机分为糖尿病组和治疗组。治疗组给予益肾汤17.7g/(蚝·d)灌胃;糖尿病组予等量自来水灌胃;正常组自由进食水。益肾汤由枸杞、淫羊霍、女贞子、仙灵脾、肉苁蓉、黄芪、山药组成。实验2个月后各组进行血糖和阴茎勃起潜伏期检测。每组随机抽取6只大鼠,留取阴茎海绵体行恒冷切片。1.2检测方法血糖测定:用葡萄糖氧化酶法。阴茎勃起潜伏期的测定:将生理药理多用仪的刺激电极放置于大鼠阴茎根部,予局部电刺激,电流强度12mA,记录从刺激开始至阴茎勃起的时间。阴茎海绵体NOS活性测定:将新鲜的阴茎海绵体组织冰冻切片,10“m,NAl)PH—d旧0法完成酶组化染色,树胶封片。光镜下NOS阳性产物为紫蓝色,然后进行图像分析,取平滑肌细胞区测灰度值,每张切片随机取10个视野计算其平均值。1.3统计学方法数据以均数±标准差(互±s)表示,采用£检验。2结果2.1各组大鼠血糖、阴茎勃起潜伏比较2个月时治疗组血糖较糖尿病组血糖下降,差异无显著性(JP>0.05)。治疗组的勃起潜伏期较糖尿病组明显缩短(P<0.05)。见表1。表1各组大鼠血糖、阴茎勃起潜伏比较(z±s)注:与糖尿病组比较,‘P<O.05。2.2阴茎海绵体NOS酶组化染色NOS阳性成分主要位于平滑肌细胞浆内。正常组大量平滑肌细胞呈紫蓝色。治疗组部分平滑肌呈蓝色或紫蓝色。糖尿病组只有少量平滑肌细胞着色,且呈浅色。NOS图像分析仪测定灰度值结果:糖尿病组、治疗组、正常组分别为(32.26±3.98)%、(27.80±2.98)%和(26.48±7.80)%,糖尿病组平均灰度值明显高于正常组(P<0.05),表明糖尿病组酶的活性显著降低;治疗组平均灰度值接近于正常组,明显低于糖尿病组(P<0.05),表明治疗组酶活性高于糖尿病组。3讨论糖尿病性勃起功能障碍其确切机制不明,近年来国内外学者通过大量的体内外实验证实了NO是一种阴茎勃起的非肾上腺素,非胆碱能神经递质”0,能促进与激活腺苷环化酶,促进细胞合成环磷酸腺苷(CGMP),减少细胞内ca“浓度,增强阴茎海绵体的松弛。NOS能催化L一精氨酸转化为L一瓜氨酸和NO,NOS是生成N0的关键酶,因而N0s活性降低被解释为勃起功能障碍主要的病理机制之一。本实验结果显示,益肾汤显著提高NOS的活性,缩短阴茎勃起潜伏期,但其降糖作用不明显。根据症状和体征糖尿病性勃起功能障碍属中医“阳痿…‘宗筋弛纵”等范畴,其主要病机为消渴日久致肾精亏损,命门火衰。方中枸杞、淫羊霍、女贞子滋肾填精,仙灵脾、肉苁蓉温肾壮阳,黄芪,山药益气健脾,补后天以助先天。全方阴阳互补,壮阳而不损阴,共奏温‘肾填精,振阳兴痿之功。本方在临床应用中取得较好的疗效,在本实验中也显示能明显缩短阴茎勃起潜伏期,表明其有确切治疗糖尿病勃起功能障碍的作用,其可能的一种作用机制是提高阴茎NOS的活性而不是通过降血糖来实现的。参考文献[1]钱荣立.糖尿病临床指南[M].北京:北京医科大学出版社,2000:268.[2]熊抗辉,赵经纬,王百忍.还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH—d)组化方法操作步骤中各种参数的选择[J].神经解剖学杂志,1996,12(1):79—82,107.[3]MelisMR,SuccuIs,MauriA,eta1.NiⅢcoxid。productio~1isincre£tsedintheparaventricularnucleus0fthehypothalamus0fmaleratsduri【lgnon—contactpenileerectionsandcopulation[J].EllrJNeurosci,1998,10(6):1968—1974.(收稿日期:2008一Ol—05)
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